论著
牙髓卟啉单胞菌脂多糖对小鼠成骨细胞基质金属蛋白酶9表达的影响
中华口腔医学杂志, 2017,52(08) : 499-503. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2017.08.010
摘要
目的

探讨牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)脂多糖对小鼠成骨细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响及核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路是否参与此过程,从分子水平更好地了解根尖周疾病骨破坏的发生机制。

方法

实验分为3部分,以不同质量浓度的Pe脂多糖[0(空白对照组)、1、5、10、15及20 mg/L]刺激MC3T3-E1细胞24 h;以10 mg/L Pe脂多糖作用于细胞不同时间(0、10、24、48 h)后,采用实时反转录PCR、酶联免疫吸附测定和明胶酶谱法检测MMP-9 mRNA和蛋白的表达以及酶活性变化;采用NF-κB信号通路特异性抑制剂BAY 11-7082预处理1 h,检测其对Pe脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后MMP-9 mRNA表达的影响。对结果行单因素方差分析和Dunnett t检验。

结果

不同质量浓度Pe脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,MMP-9 mRNA和蛋白的表达具有剂量依赖性,蛋白表达量从(5 395±362)ng/L(空白对照组)增加到(12 684±375)ng/L(20 mg/L组)。用10 mg/L Pe脂多糖作用于MC3T3-E1细胞24 h时,MMP-9 mRNA表达量最高,约为空白对照组的7倍,随着作用时间延长,MMP-9 mRNA表达量下降;当10 mg/L Pe脂多糖作用于MC3T3-E1细胞48 h时MMP-9的蛋白表达量最高[(35 055±2 346)ng/L];酶活性也最高。10 mmol/L的BAY 11-7082预处理细胞1 h后,显著降低了Pe脂多糖诱导的MMP-9 mRNA的表达水平(P<0.01)。

结论

Pe脂多糖可能通过激活NF-κB信号通路诱导小鼠成骨细胞表达MMP-9。

引用本文: 李晓琳, 于雅琼, 仇丽鸿, 等.  牙髓卟啉单胞菌脂多糖对小鼠成骨细胞基质金属蛋白酶9表达的影响 [J]. 中华口腔医学杂志,2017,52( 08 ): 499-503. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2017.08.010
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基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)是近年发现的可降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的一种重要蛋白酶,是明胶酶的一种,在正常情况下其表达量和活性处于低水平,但在损伤性病理过程(如慢性炎症和骨损伤病变)中,MMP-9的表达量和活性显著升高。牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)是根尖周感染的重要病原菌,Pe脂多糖是其主要致病因子之一,其含量和临床症状与骨质破坏范围呈正相关。已有研究证实MMP-9在根尖周炎病变组织中高表达[1,2],本研究旨在探讨Pe脂多糖对小鼠成骨细胞MMP-9表达的影响及核因子κB(nucler,factor-κB,NF-κB)信号通路是否参与此过程,以期从分子水平更好地了解根尖周疾病骨破坏的发生机制,为其靶向治疗提供新思路。

 
 
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卟啉单胞菌,牙髓
基质金属蛋白酶9
信号通路
脂多糖类
成骨细胞